アブストラクト(35巻2/3号:神奈川歯学)

神奈川歯学

Japanese

Title : 口腔白板症におけるin situ TRAP法を用いたテロメラーゼ活性の検出
Subtitle :
Authors : 石崎勤, 三好代志子
Authors(kana) : いしざきつとむ, みよしよしこ
Organization : 神奈川歯科大学口腔病理学教室
Journal : 神奈川歯学
Volume : 35
Number : 2/3
Page : 114-123
Year/Month : 2000 / 9
Article : 原著
Publisher : 神奈川歯科大学学会
Abstract : テロメアDNAの延長機能をもつテロメラーゼは不死化細胞やヒト癌細胞で高い活性を示し, ヒト癌組織の約85%にテロメラーゼ活性が認められることが報告され, 悪性腫瘍の発生や進展に重要な役割を果たすことが明らかにされている. 筆者らもこれまでTRAP法を用いて, 口腔扁平上皮癌や悪性唾液腺腫瘍組織に強いテロメラーゼ活性が認められることを報告してきた1~3). しかしTRAP法によるテロメラーゼ活性測定法は, 組織における一定のタンパク量当たりの活性を検出することから, 組織内に存在する特定の細胞におけるテロメラーゼ活性が発癌や癌の増殖に関与している直接的な証明にはならない. そこで癌細胞の存在を診断する目的で, 蛍光TRAP法によるスライドグラス上に固着させた細胞でテロメラーゼ活性を検出するin situ TRAP法が開発された4~6). 本研究では, テロメラーゼ活性が明らかにされているヒト上咽頭原発扁平上皮癌由来培養細胞株KB cellおよびヒト前立腺癌由来培養細胞株LNCap cellに発現するテロメラーゼ活性を塗抹細胞レベルで検出することを試みた.
Practice : 歯科学
Keywords : テロメラーゼ, in situ TRAP, 口腔白板症, 培養細胞

English

Title : Detection of Telomerase Activity in Oral Leukoplakia Using the in situ TRAP Assay
Subtitle :
Authors : Tsutomu ISHIZAKI, Yoshiko MIYOSHI
Authors(kana) :
Organization : Department of Oral Pathology,Kanagawa Dental College
Journal : Kanagawa Shigaku
Volume : 35
Number : 2/3
Page : 114-123
Year/Month : 2000 / 9
Article : Original article
Publisher : Kanagawa Odontological Society
Abstract : Early diagnosis of precancerous lesion needs immunohistochemical study, analysis of DNA ploidy, or study of the cell cycle by flowcytometry. Currently, specific association of human telomerase activity with carcinogenesis was reported. In this report, we examined the usefulness of telomerase activity for diagnosing cancer by utilizing telomerase reaction amplification protocol (TRAP) assay and in situ TRAP assay. Telomerase activity was analyzed in human oral cancer cell line (KB), human prostate carcinoma cell line (LNCap), a human fetal lung fibroblast cell line (TIG-1), and 5 cases of oral leukoplakia tissues using both the PCR-based TRAP assay and in situ TRAP assay with fluorescenceend-labeling primers. Telomerase activity was detected in all cancer cell lines (KB and LNCap), but not in the normal cell line (TIG-1). In 3 out of 5 oral leukoplakia cases with mild to moderate dysplasia, telomerase activity was observed. None of hyperplastic squamous epithelium without any dysplasia exhibited telomerase activity. The human cancer cell lines (KB and LNCap) and these three leukoplakia tissues unequivocally displayed nuclear specific fluorescent signals, indicating positive telomerase activities in situ. Thus, it is possible that telomelase activity is detectable not only in precancerous tissue extracts but also cytological as well as the histological specimens, therefore these applications may have great advantages for the early detection of oral cancers.
Practice : Dentistry
Keywords :